Como usar as validações de esponja de celulose para coleta, preparação e processamento de amostras?


Como usar esponja de celulose para coleta de amostras caseiras?


Essas abordagens de amostragem foram organizadas com o auxílio dos Centros de Controle e Prevenção de Doenças (CDC) para fornecer estratégias padronizadas para higienistas industriais ou diferentes amostradores treinados para usar na amostragem de esporos de Bacillus anthracis (B. anthracis). Essas táticas substituem as estratégias anteriores do CDC para coletar amostras ambientais para B. anthracis, incluindo procedimentos abrangentes para coleta de amostras ambientais para cultivo de Bacillus anthracis, que foram desenvolvidos em algum estágio dos eventos terroristas de antraz em 2001. Conforme mencionado nessa orientação, o CDC deliberou substituir a prática à medida que novos fatos se tornassem disponíveis. Em particular, uma troca precisa são os esforços atuais por meio do CDC para validar técnicas para o processamento laboratorial e avaliação de esporos de B. anthracis.





Esses métodos devem ser usados ​​para uma série de amostras em superfícies lisas e não porosas e podem ser usados ​​em ambientes internos e de portas. Exemplos de superfícies não porosas são aço inoxidável, painel de parede pintado, ladrilho ou laminado de madeira. Cada técnica de amostragem tem seus usos e vantagens precisas. As estratégias de amostragem devem ser coordenadas com o laboratório para garantir que estejam equipados para receber e sistematizar todas as amostras. Isto é, em particular, vital se se desviar dos procedimentos de amostragem validados.


Os cotonetes são esplêndidos para amostrar pequenas superfícies ou desafiar a obtenção de áreas de muito menos de dez centímetros retangulares (in2), como fendas, cantos, difusores de ar, grades de retorno de ar e locais de difícil acesso. Lenços umedecidos são lindos para amostras de grandes superfícies não porosas, inclusive paredes, mesas e pisos. Um esforço interagências reconhecido como Grupo de Trabalho de Plano de Amostragem Validado (VSPWG) está atualmente criando um registro intitulado Guia de Referência para Desenvolvimento e Execução de Planos de Amostragem de Bacillus anthracis em Ambientes Internos, que descreve processos e metodologias para representar e remediação de informações de sites internos com possível ou contaminação adequada. O documento VSPWG, assim que publicado, precisa ser consultado para estatísticas extras sobre técnicas e treinamento para amostragem de B. anthracis. Este registro também ajudará a interpretar os resultados de amostras acumuladas com esfregaços de macrofoam e esponjas de celulose em superfícies lisas e não porosas seguindo esses procedimentos de série.



Observação:


Dados adicionais relacionados à amostragem do Bacillus anthracis, junto com dicas para defender os investigadores durante a amostragem, estão disponíveis em www.cdc.gov/niosh/topics/anthrax/ e www.cdc.gov/niosh/docs/2009-132/default.html .



As amostras relacionadas a uma cena de crime ou suspeita de um torneio fraudulento devem ser coordenadas com as autoridades reguladoras. Os grupos de amostragem querem estar cientes de que as peças acumuladas podem ser ou vir a ser evidências falsas e que estratégias extras relacionadas à série de padrões serão necessárias.





Procedimento de esponja de celulose

Validações da esponja de celulose para coleta de amostra


1. Luvas, nitrilo


2. Régua, fita descartável e de sobreposição


ou


Modelo de amostra, descartável, dimensão de vizinhança do padrão 100 in2 (645 cm2)



3. Esponja, estéril, pré-umedecida com 10 mL de solução tampão neutralizante, esponja de celulose de 1,5 a três polegadas dobrada sobre um pano (como o bastão de esponja de celulose PUSPONGE)


ou


Esponja, estéril, seca, 1,5 utilizando esponja de celulose de três polegadas dobrada sobre um cuidado (como o PUSPONGE Sponge-Stick [Validações de esponja de celulose sem biocida para coleta de amostra])


e


O tampão neutralizante geral que inativará desinfetantes halógenos e compostos de amônio quaternário, estéril, 10 mL (como o tampão neutralizante [Hardy Diagnostics, Santa Maria, Califórnia; ampla variedade de catálogo K105] ou equivalente)



4. Recipiente de amostra com tampa de rosca, estéril, embalado pessoalmente em quatro onças (como recipiente de amostra de uso geral [Kendall Healthcare, Mansfield, Massachusetts; catálogo de grande variedade 8889-207026] ou equivalente)



5. Rótulos de amostra ou marcador permanente



6. Saco de plástico reutilizável, de 1 quarto ou menor



7. Saco de plástico reutilizável, 1 galão ou maior




Procedimento de amostragem de esponja de celulose


1. Usando um par de luvas confortável sobre as luvas atuais, coloque o gabarito descartável sobre o local a ser amostrado e torne-o impenetrável. Se um gabarito não puder ser usado, meça o local de amostragem com uma régua descartável e delineie a área a ser testada com fita adesiva. A vizinhança do piso amostrada deve ser muito menor ou igual a cem in2 (645 cm2).



2.Retire a esponja esterilizada da embalagem. Segure a esponja perto do topo da alça. Agora, não lide com a parada sob o polegar.




3.Se a esponja estéril não estiver mais pré-umedecida, umedeça a esponja com o auxílio de despejar o recipiente de 10 mL de solução tampão neutralizante sobre a esponja seca.


Nota: A esponja umedecida não deve mais pingar solução tampão neutralizante.


Nota: Qualquer nova resposta do buffer de neutralização deve ser descartada.


4. Limpe o chão a ser amostrado com a utilização da esponja estéril umedecida, colocando a parte mais ampla da esponja na superfície, deixando a parte central apenas levantada. No entanto, aplique tensão moderada da empresa e use uma amostra 'S' sobreposta para cobrir todo o piso com pinceladas horizontais.


5. Vire a esponja e limpe o local igual mais uma vez com o uso de movimentos verticais em 'S'.


Esponja fazendo uso de pinceladas verticais 'S'


6. Use as bordas da esponja (lados estreitos) para limpar a localização exata do uso de golpes diagonais em 'S'.



7. Use a ponta da esponja para limpar o perímetro da área de amostragem.



8.Coloque a ponta da esponja imediatamente em um recipiente estéril de amostra. Quebre a ponta da esponja com o auxílio de dobrar a alça. A liberação do cabo da esponja, tocada com o suporte do coletor, não precisa mais entrar em contato com o interior do recipiente da amostra. Sele e rotule a caixa com segurança (por exemplo, identificador de padrão específico, localização do padrão, iniciais do coletor e padrão de data e hora que foi coletado uma vez).



9.Coloque o recipiente de padrão em um saco plástico de 1 quarto que pode ser fechado novamente. Selar e rotular com segurança a carga (por exemplo, local do padrão, padrão de data e hora usado para ser coletado e identificar a pessoa que está acumulando a amostra). Os contêineres de amostras e bagagem que pode ser fechada também podem ser pré-etiquetados para ajudar na eficiência da amostragem.


Observação: remova o ar excessivo da bagagem de plástico que pode ser fechada novamente para aumentar a ampla variedade de amostras que podem ser enviadas em um contêiner.



10.Elimine o modelo, se usado.



11.Retire as luvas externas e descarte. Luvas limpas devem ser usadas para cada nova amostra.




Em Branco

Espaços em Branco


Os espaços em branco são amostras tratadas exatamente da mesma forma que aquelas usadas para coletar amostras da área, sem que agora não possam entrar em contato com a superfície contaminada. É usado para estimar doenças surgindo da orientação para amostragem, técnica de amostragem e carga e armazenamento antes da análise. O número de brancos de assunto acumulados deve ser igual a pelo menos 10% das amostras coletadas. Os espaços em branco devem ser acumulados enquanto na área contaminada. Ao transportar lisas (luvas estéreis para manuseio de gaze), o cotonete de macrofoam, esponja de celulose ou gaze deve ser eliminado de sua embalagem, umedecido (conforme necessário, consulte as seções 3.1, 3.2 e 3.3) e, em seguida, posicionado no recipiente fantástico (também tubo de centrifugação ou recipiente de amostra). Uma alíquota do elemento não utilizado da resposta tampão de neutralização aberta deve ser adicionalmente acumulada quando do uso de um swab de macrofoam, esponja de celulose ou gaze que não está mais pré-umedecida.





Vazios de mídia

Os brancos de mídia são amostras não expostas usadas para correção de histórico de leituras de padrão ou para estudos de recuperação. Forneça dois meios de impressão não abertos (swab de macrofoam, esponja de celulose ou gaze) por lote usado e conceda duas amostras fechadas e não utilizadas da resposta do tampão neutralizante (se não for mais o uso de mídia pré-umedecida) como brancos de mídia para o laboratório de processamento.





Descontaminação

Descontaminação do saco de amostra



Coloque vários da bagagem de plástico de 1 litro que pode ser fechada em uma sacola de plástico que pode ser fechada novamente. Sele com segurança o saco plástico resselável de 1 galão e rotule o saco (por exemplo, selecione as amostras contidas no saco plástico resselável, locais de padrão, data e hora em que as amostras foram coletadas e identifique a pessoa que reuniu as amostras).


Descontamine o piso externo da grande sacola plástica que pode ser fechada com o uso de uma solução de alvejante com pH ajustado (alvejante doméstico diluído 1: 9; pH ajustado para 6,8-8,0) com um tempo de contato de 10 minutos antes da sacola de plástico que pode ser fechada. deixa a área contaminada. Esta resposta pode ser organizada por:



Etapa 1: Misturar uma seção de alvejante da família (5,25 a 6,0 p.c. hipoclorito de sódio) com 5 componentes de água (v / v);


Etapa 2: adicionar 1 seção de vinagre branco; e


Etapa 3: adicionar três componentes de água extra.


Nota: Registros adicionais sobre descontaminação podem ser encontrados em



www.epa.gov/opp00001/factsheets/chemicals/bleachfactsheet.htm



Seque completamente o quintal da sacola plástica que pode ser fechada novamente.


Preencha um formulário de cadeia de custódia.


Observação: uma vez que o saco plástico externo que pode ser lacrado seja descontaminado, ele não precisa mais ser aberto ao ar livre em um laboratório com ótima contenção.


Coloque o saco plástico grande que pode ser fechado em um recipiente adequado para entrega (consulte a seção Remessa de Amostras).


Descontaminação de bolsas contendo documentação

Coloque as folhas de padrão e a documentação adicional em um saco plástico que pode ser fechado novamente. Os lençóis devem ser posicionados dois por saco, com a frente de cada lençol estendendo-se por toda parte. Sele e rotule com segurança o saco (por exemplo, locais de padrão correspondentes, data e hora em que as amostras foram coletadas e o título da pessoa que acumulou as amostras).



Nota: É essencial escrever apenas em um aspecto do papel, o rosto, ao coletar informações.


Descontamine o piso externo do grande saco de plástico resselável com o uso de uma solução de alvejante com pH brilhante (alvejante doméstico diluído 1: 9; pH ajustado para 6,8-8,0) com um tempo de contato de 10 minutos antes do que o saco de plástico pode ser fechado área contaminada. Esta resposta pode ser organizada por:



Etapa 1: Mistura de lixívia de família de uma fase (5,25 a 6,0 p.c. hipoclorito de sódio) com água de cinco componentes (v / v);


Etapa 2: Adicionar vinagre branco monofásico; e


Etapa 3: adicionar três componentes de água extra.


Observação: fatos adicionais sobre descontaminação podem ser encontrados em www.epa.gov/opp00001/factsheets/chemicals/bleachfactsheet.htm



Seque completamente a parte externa do saco plástico que pode ser fechado novamente.


Preencha um formulário de cadeia de custódia.


Observação: uma vez que a sacola plástica externa que pode ser fechada novamente é descontaminada, ela não precisa ser aberta no quintal de uma contenção fabulosa.


Coloque o saco plástico grande que pode ser fechado em um lindo contêiner para envio.



Remessa de Amostra

Transporte todas as amostras para o laboratório de processamento em gelo úmido ou em embalagens sem sangue.


Observação: as amostras também podem ser salvas entre 2 ° C e 8 ° C antes do processamento e precisam ser processadas dentro de 48 horas após a coleta.



Uma cadeia de custódia adequada e tipos de solicitação analítica devem ser protegidos com cada carga despachada para o laboratório de processamento. Os recipientes usados ​​para transportar as amostras e a documentação e ferramentas contaminadas que acompanham precisam ser organizados e despachados de acordo com as regras excelentes para o transporte de produtos infecciosos. O Código de Regulamentações Federais mais contemporâneo, as diretrizes da Associação Internacional de Transporte Aéreo e diferentes regulamentadores ou publicações educacionais precisam ser consultados para obter instruções concorrentes. O remetente é responsável por garantir o cumprimento dos regulamentos mais atuais e fantásticos.



Nota: Não transporte equipamentos / suprimentos contaminados em um recipiente igual ao das amostras.

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